Descrição
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Descrição:
O meio de Iscove (IMDM) é uma modificação do Dulbecco’s Modified Eagle’s Medium (DMEM), introduzida em 1976 por Guilbert & Iscove. O meio é suplementado com selênio, vitaminas, aminoácidos, piruvato de sódio e tampão HEPES. O nitrato de ferro, da formula original foi substituído por Nitrato de potássio. Posteriormente, outros suplementos contendo albumina, lecitina e transferrina foram acrescidos, assim este meio é apropriado para o crescimento de células precursoras de macrófagos e eritrócitos sem a necessidade de acrescentar soro de outra origem ao meio.
O meio de Iscove tem demonstrado ser um excelente suporte para o crescimento de linfócitos B murinos, tecidos hematopoieticos de medula, células B estimuladas com lipopolissacarídeos, linfócitos T e uma variedade de células híbridas.
Aplicações:
O IMDM é frequentemente utilizada para o crescimento serum-free de células hematopoiéticas. Isto inclui linhagens celulares de fusão como oshibridomas.
Recommendado como formulação base para o desenvolvimento de qualquer outro meio serum-free.
A adição do tampão HEPES incrementa a capacidade do meio e aumenta a abrangência do tamponamento ao máximo.
Recomendado para células que crescem melhor em pHs acima de 7,2.
Referências:
Iscove, N.N and Melchers, F. (1978). Complete Replacement of Serum by Albumin, Transferrin, and Soybean Lipid in Cultures of Lipopolysaccharide-Reactive B Lymphocytes. J. Exp. Medicine. 147, 923-933.
Iscove, N.N., Guilbert, L.J. and Weyman, C. (1980). Complete Replacement of Serum in Primary Cultures of Erythropoietin
Dependent Red Cell Precursers [CFU-E] by Albumin, Transferrin, Iron, Unsaturated Fatty Acid, Lecithin and Cholesterol. Exp. Cell Research. 126, 121-126.
Composição do meio de Iscove
Sais inorgânicos mg/L
CaCl2 (anidro) 165
KCl 330
KNO3 0,076
MgSO4 (anidro) 97,67
NaCl 4.505
Na2SE3 (anidro) 0,0114
NaH2PO4·H2O 125
Aminoácidos mg/mL
L-Alanina 25
L-Arginina HCl 84
L-Asparagina H2O 28,4
L- Ácido Aspártico 30
L-Cistina 2HCl 91,24
L-Ácido Glutâmico 75
L-Glutamina 584
Glicina 30
L-Histidina HCI·H2O 42
L-Isoleucina 105
L-Leucina 105
L-Lisina HCl 146
L-Metionina 30
L-Fenilalanina 66
L-Prolina 40
L-Serina 42
L-Treonina 95
L-Triptofano 16
L-Tirosina 2Na·2H2O 103,79
L-Valina 94
Vitaminas mg/mL
d-Biotina 0,013
D-Ca Pantotenato 4
Cloreto de Colina 4
Ácido Fólico 4
Mio-Inositol 7,2
Niacinamida 4
Piridoxal HCl 4
Riboflavina 0,4
Tiamina HCl 4
Vitamina B-12 0,013
Outros componentes mg/mL
D-Glicose 4.500
HEPES 5.958
Vermelho de fenol 15,9
Piruvato de Sodio 110
NaHCO3 3.024
